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Méthode de détection de la teneur en glucose, triterpène et stérol du Ganoderma Lucidum

Nombre Parcourir:0     auteur:Éditeur du site     publier Temps: 2024-11-21      origine:Propulsé

enquête

[Détermination du contenu] Préparation de la solution de substance de référence polysaccharide : prenez une quantité appropriée de substance de référence de glucose anhydre, pesez-la avec précision et ajoutez de l'eau pour obtenir une solution contenant 0,12 mg pour 1 ml.


Préparation de la courbe standard : Mesurez avec précision 0,2 ml, 0,4 ml, 0,6 ml, 0,8 ml, 1,0 ml, 1,2 ml de la solution de référence, mettez-la dans un tube à essai gradué de 10 ml avec bouchon, ajoutez de l'eau à chacun jusqu'à 2,0 ml et ajoutez 6 ml. de la solution anthrone-acide sulfurique (peser précisément l'anthranone 0,1g, dissoudre avec 100 ml d'acide sulfurique et bien agiter) rapidement et précisément, agitez immédiatement, placez-le pendant 15 minutes, placez-le immédiatement dans un bain de glace pour le refroidir pendant 15 minutes et sortez-le. Avec le réactif correspondant comme blanc, selon la spectrophotométrie ultraviolet-visible, mesurer l'absorbance à une longueur d'onde de 625 nm, tracer une courbe étalon avec l'absorbance en ordonnée et la concentration en abscisse.


Préparation de la solution de test : prendre environ 2 g de ganoderma lucidum poudre, pesez-la avec précision, mettez-la dans un ballon à fond rond, ajoutez 60 ml d'eau et laissez-la pendant 1 heure, chauffez le flux solide pendant 4 heures, filtrez à chaud et lavez le filtre et les résidus de filtre avec une petite quantité d'eau chaude. eau. Mettre le résidu du filtre et le papier filtre dans une fiole, ajouter 60 ml d'eau, chauffer au reflux pendant 3 heures, filtrer à chaud, mélanger le filtrat, le mettre au bain-marie et le sécher à la vapeur, dissoudre le résidu avec 5 ml d'eau, ajouter lentement 75 ml d'éthanol en remuant, bien agiter, laisser à 4°C pendant 12 heures, centrifuger, jeter le surnageant, dissoudre le précipité avec de l'eau chaude et transférer dans un doseur de 50 ml. flacon, laisser refroidir, ajouter de l'eau jusqu'au trait, bien agiter. Prenez une quantité appropriée de solution, centrifugez, mesurez avec précision le surnageant 3 ml et mettez-le dans une fiole graduée de 25 ml, ajoutez de l'eau jusqu'au trait, agitez bien, et c'est prêt.


Méthode de détection : prélevez avec précision 2 ml de la solution d’échantillon à tester et placez-la dans un tube à essai gradué de 10 ml avec bouchon. Selon la méthode de préparation de la courbe étalon, à partir de « Ajoutez rapidement et précisément 6 ml de solution de sulfate de cétone d'oignon », procédez de la même manière pour déterminer l'absorbance. Lisez la teneur en glucose anhydre dans la solution de test en fonction de la courbe étalon, calculez-la et obtenez-la.


Ce produit est calculé sous forme de produit sec et la teneur en polysaccharide de Ganoderma lucidum est calculée sous forme de glucose anhydre (C6H12O6), au moins 0,90 %.


Triterpènes et stérols

Préparation de la solution de substance de référence : prenez une quantité appropriée de substance de référence d'acide oléanolique, pesez-la avec précision et ajoutez du méthanol pour obtenir une solution contenant 0,2 mg pour 1 ml.


La précision de préparation de la courbe standard : Prendre 0,1 ml, 0,2 ml, 0,3 ml, 0,4 ml, 0,5 ml de la solution de référence, les mettre dans un tube à essai gradué de 15 ml avec bouchon, le sécher et le laisser refroidir. Ajouter précisément 0,2 ml de Solution d'acide acétique glacial de vanilline fraîchement préparée (peser précisément 0,5 g de vanilline et ajouter de l'acide acétique glacial pour la dissoudre dans 10 m pour l'obtenir) et 0,8 ml d'acide perchlorique, bien agiter. Chauffez-le au bain-marie à 70°C pendant 15 minutes, placez-le immédiatement dans un bain de glace pour le refroidir pendant 5 minutes, puis sortez-le, ajoutez précisément 4 ml d'acétate d'éthyle et agitez bien. Avec le réactif correspondant comme blanc, selon la spectrophotométrie ultraviolet-visible, mesuré à une longueur d'onde de 546 nm pour l'absorbance, tracer une courbe étalon avec l'absorbance en ordonnée et la concentration en abscisse.


Préparation de la solution de test : Prendre environ 2 g de poudre de ganoderma lucidum, la peser avec précision, la mettre dans une fiole conique bouchée, ajouter 50 ml d'éthanol, traiter par ultrasons (à puissance 140 W, fréquence 42 kHz) pendant 45 minutes, filtrer et mettre le filtrat. dans une fiole doseuse de 100 ml. Utilisez une quantité appropriée d’éthanol pour laver le filtre et les résidus de filtre par lots. Mettez toute la lotion dans le même flacon doseur, ajoutez de l'éthanol jusqu'à la marque, agitez bien et récupérez.


Méthode de détection : Mesurez avec précision 0,2 ml de la solution de test et mettez-la dans un tube à essai gradué de 15 ml avec bouchon. Selon la méthode de préparation de la courbe étalon, à partir de la « volatilisation », procéder de la même manière pour mesurer l'absorbance. Lire la teneur en glucose anhydre dans la solution d'essai en fonction de la courbe étalon, la calculer et l'obtenir.


Ce produit est calculé comme un produit sec et la teneur en triterpénoïdes et stérols est mesurée par l'acide oléanolique (C30H48O3) et ne doit pas être inférieure à 0, 50 %.





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